بررسی کارائی سیستم phic31 اینتگراز جهت انتقال هدفمند ژن در روش smgt
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
- نویسنده محمد هادی سخاوتی
- استاد راهنما مجتبی طهمورث پور محمد رضا نصیری
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1391
چکیده
ساخت حیوانات تراریخته با استفاده از اسپرم به عنوان حامل dna خارجی (smgt) یکی از روش های شناخته شده در بحث حیوانات تراریخته محسوب می شود. امروزه از تزریق درون سیتوپلاسمی اسپرم (icsi) در این روش، استفاده های قابل توجهی به عمل می آید. با توجه به سادگی و راندمان بالا در ساخت حیوانات تراریخته در روش smgt الحاق تصادفی ژن در این روش یکی از ایرادهای اساسی مرتبط با این تکنیک محسوب می شود. در این مطالعه سعی گردید کارائی سیستم phic31 integrase به عنوان یک روش انتقال هدفمند ژن، در بهبود روش smgt مورد ارزیابی قرار گیرد. بدین منظور ابتدا روش icsi با استفاده از اعمال پیش تیمار هپارین-گلوتاتیون بر روی اسپرم بهینه سازی گردید. در مرحله بعد پروتئین و mrna اینتگراز در شرایط آزمایشگاهی تولید و عملکرد محصولات تولید شده مورد ارزیابی قرار گرفت. تعداد 7 جایگاه قابل شناسائی توسط سیستم phic31 integrase بر روی ژنوم گاو در نظر گرفته شد. با طراحی پرایمرهای مناسب و واکنش pcr صحت این جایگاه ها در فیبروبلاست های تراریخته شده گاوی به وسیله سیستم phic31 integrase ، مورد بررسی قرار گرفت. راندمان سیستم phic31 integrase با استفاده از تزریق mrna به همراه اسپرم حاوی dna بررسی گردید. نتایج این مطالعه نشان داد، سیستم phic31 اینتگراز توانائی انتقال هدفمند ژن به داخل جنین های حاصل از smgt را داشت.
منابع مشابه
افزایش بیان گیرنده آنتی‌ژن کایمریک بر سطح لنفوسیت‌های T به کمک الحاق ژنومی
چکید ه سابقه و هدف فعال‌سازی اختصاصی سیستم ایمنی به ویژه لنفوسیت‌های T ، یکی از اهداف اساسی در حوزه ایمونوتراپی سرطان است . به منظور القای سلول‌های ایمنی فرد بیمار، از گیرنده‌های کایمریکی که حاوی خاصیت اتصال ویژه به آنتی‌ژن‌ها هستند، استفاده شده است تا لنفوسیت‌های T سیتوتوکسیک را فعال کنند. گیرنده کایمریک، متشکل است از قسمت متصل شونده به آنتی‌ژن از آنتی‌بادی که از طریق یک مولکول اتصال‌دهن...
متن کاملPhiC31-based Site-Specific Transgenesis System for Production of Transgenic Bovine Embryos by Somatic Cell Nuclear Transfer and Intracytoplasmic Sperm Injection
OBJECTIVES The Streptomyces phage phiC31 integrase offers a sequence-specific method of transgenesis with a robust long-term gene expression. PhiC31 has been successfully developed in a variety of tissues and organs for purpose of in vivo gene therapy. The objective of the present experiment was to evaluate PhiC31-based site-specific transgenesis system for production of transgenic bovine embry...
متن کاملبررسی کارایی انتقال ژن از طریق اسپرم (smgt) در تولید آزمایشگاهی رویان های تراریخته بز
بر اساس علاقه فزاینده موجود در استفاده از فناوری انتقال ژن بواسطه اسپرم (smgt) به عنوان یک روش ساده و موثر در تولید حیوانات تراریخته، در تحقیق حاضر امکان استفاده از این فناوری در تولید رویان های تراریخته بز برای اولین بار در جهان مورد بررسی قرار گرفته است. اسپرم بز با پنج غلظت مختلف (0 تا 500 نانوگرم) از پلاسمید pcdna/his/lac-z ترانسفکت گردید و برای لقاح آزمایشگاهی (ivf) و یا تزریق درون سیتوپلا...
طراحی و ساخت سازه‌های پلاسمیدی مختص انتقال هدفمند ژن به ژنوم کلروپلاستی
الحاق ژن خارجی در ژنوم کلروپلاستی از طریق نوترکیبی همتا بین توالی‌های مجاور آن ژن در حامل‌های کلروپلاستی، رخ می‌دهد. از آنجایی که شباهت صد در صدی توالی هدف‌گیری‌کننده کارایی تراریختی پلاستوم را به طور چشمگیری افزایش خواهد داد، یک جفت پرایمر برای جداسازی این ناحیه طوری طراحی گردید که دارای شباهت صد در صدی در تمامی پلاستوم‌های گیاهی باشد، ولی طول و توالی ناحیه تکثیری در ژنوم‌های مختلف متفاوت بود....
متن کاملافزایش بیان گیرنده آنتی ژن کایمریک بر سطح لنفوسیت های t به کمک الحاق ژنومی
چکید ه سابقه و هدف فعال سازی اختصاصی سیستم ایمنی به ویژه لنفوسیت های t ، یکی از اهداف اساسی در حوزه ایمونوتراپی سرطان است . به منظور القای سلول های ایمنی فرد بیمار، از گیرنده های کایمریکی که حاوی خاصیت اتصال ویژه به آنتی ژن ها هستند، استفاده شده است تا لنفوسیت های t سیتوتوکسیک را فعال کنند. گیرنده کایمریک، متشکل است از قسمت متصل شونده به آنتی ژن از آنتی بادی که از طریق یک مولکول اتصال دهنده...
متن کاملبررسی کارائی روش انتشار آوایی در رفتارنگاری شکست مواد ترد
یکی از جنبه های جدید مطالعاتی در حوزه مکانیک سنگ تحقیق روی مکانیک شکست و روش‌های تحلیلی آن است. روش‌های مختلفی به منظور رفتارنگاری و بررسی پارامترهای مؤثر در شکست توسعه و کاربردی شده‌اند. یکی از این روش‌ها که در سال‌های اخیر به دلیل ویژگی‌های منحصر بفرد بسیار مورد توجه محققین قرار گرفته و در حوزه بررسی‌های مکانیک شکست در مواد مختلف کاربردی شده، روش انتشار آوایی است. در این تحقیق با ارائه روش‌ه...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023